生物除油劑初步研究：實(shí)驗(yàn)

【簡(jiǎn)介】

2．1菌種來源

    自然環(huán)境中，能夠降解石油成分的微生物多達(dá)200種以上。其中，假單胞菌屬、棒桿菌屬、微球菌屬和產(chǎn)堿桿菌屬中存在許多高效降解石油成分的細(xì)菌菌株^[2-3]。本試驗(yàn)從各種石油污染的環(huán)境中采集菌種樣品，作為富集馴化的菌源：(1)以威海槐云路五菱汽車修配廠廢機(jī)油、汽油、柴油污染的土壤為樣品1；(2)以威海東方大眾汽配廠受油污污染的土壤為樣品2；(3)以威海宇成線業(yè)有限公司污水排放口的土壤為樣品3；(4)以電鍍廠廢油污染的土壤為樣品4。

2．2培養(yǎng)基

    牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基用于細(xì)菌總數(shù)的測(cè)定和微生物分離，原油無機(jī)鹽培養(yǎng)基用于原油降解菌平板數(shù)量的測(cè)定。原油無機(jī)鹽培養(yǎng)基(pH=7．2)的成分如下(以質(zhì)量分?jǐn)?shù)表示)：潤(rùn)滑油0．2‰NaCl 0．5‰(NH₄)₂S0₄0．1％，MgS0₄·7H₂0 0．025％，NaN0₃ 0．2％，KH₂P0₄0．5％，K₂HP0₄·H₂0 1．0％，瓊脂l．6％。

2．3試劑和儀器

    所用石油醚等試劑均為市售分析純。

    恒溫振蕩器，哈爾濱市東聯(lián)電子技術(shù)開發(fā)有限公司；pH／溫度測(cè)試筆，意大利哈鈉公司；紫外一可見分光光度計(jì)、分析天平和可見分光光度計(jì)，上海精密儀器有限公司；離心機(jī)，上海安亭科學(xué)儀器廠。

2．4富集馴化處理

各稱取1～4號(hào)樣品200 g，分別加入蒸餾水800 mL，攪拌30 min，靜置沉淀，上清液轉(zhuǎn)移到l0 L的玻璃瓶中，從而獲得多種來源的混合菌種。然后，加入土壤浸提液1L[1 L水中加入200 g肥沃土壤(提供各種元素)，攪拌，沉淀，獲得的上清液為土壤浸提液]，控制溫度在35 ℃、pH 8．5，曝氣富集馴化數(shù)天。混合液曝氣馴化l d后測(cè)定殘油含量，然后定量補(bǔ)充潤(rùn)滑油、無機(jī)磷和無機(jī)氮等元素，調(diào)整混合液中碳、氮、磷的比例，以利于微生物的生長(zhǎng)。富集馴化液中C(即7樣機(jī)油，為馴化液質(zhì)量分?jǐn)?shù)的l％)、N[即(NH₄)₂S0₄]和 P(即KH₂P0₄)的質(zhì)量比約為l00：5：1。除油微生物馴化裝置如圖l所示。